液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效。
液相色譜儀的組成:
1、輸液系統(tǒng)
包括溶劑柜、真空脫氣機、溶劑混合器、高壓泵等,其中核心部分是泵;泵的作用提供足夠的驅動力使流動相通過填充緊密的色譜柱。
洗脫方式也分為兩種:
?。?)等度洗脫:在同一分析周期內流動相組成保持恒定,適合于組分數(shù)目較少,性質差別不大的樣品。
?。?)梯度洗脫:采用兩種(或多種)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定程序連續(xù)改變流動相的濃度配比和極性的一種洗脫模式。用于分析組分數(shù)目多、性質差異較大的復雜樣品。
2、進樣系統(tǒng)
把分析試樣有效地送入色譜柱進行分離。一般有自動進樣器和手動進樣器,進樣量應不小于定量環(huán)體積的5-10倍(最少3倍)。
3、分離系統(tǒng)
主要是色譜柱,色譜柱是一根裝滿填料的管子。色譜柱的材料有不銹鋼、塑料、玻璃等,其尺寸(內徑、長短)不盡相同;色譜柱填料主要有硅膠基質和聚合物基質,填料的粒徑不盡相同。
4、檢測器
對檢測器的要求:靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬、死體積小、對溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測器、熒光檢測器、示差檢測器等。
結構特點:
1、液相色譜儀是以液體作為流動相的色譜分離方法;
2、流動相具有運載樣品分子和選擇性分離的雙重作用;
3、適用于高沸點、大分子、強極性和熱穩(wěn)定性差的大分子化合物(常溫進樣不破壞藥